氣相色譜法測(cè)定中成藥中冰片的含量
摘 要： 采用正十二烷作內(nèi)標(biāo)，選用OV101的石英玻璃毛細(xì)管柱，建立了某藥廠中成藥膠囊中冰片含量的氣相色譜測(cè)定方法。與張亮(1994)、劉柏年(1984)工作相比，不僅大大節(jié)約了分析時(shí)間，而且分離效果更佳，測(cè)定結(jié)果的重現(xiàn)性好，標(biāo)準(zhǔn)偏差S=0.40，平均回收率高達(dá)99.0%，內(nèi)標(biāo)物與冰片的濃度比為1∶0.3～1∶1.5時(shí)峰面積與濃度成線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r=0.9997。
關(guān)鍵詞：氣相色譜法；中成藥；冰片 中圖分類號(hào)：O657.71；O623.413 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 0
引 言 在用文獻(xiàn)［1］［2］的方法測(cè)定某藥廠中成藥中的冰片含量時(shí)，考慮到原方法的分析時(shí)間較長(zhǎng)所帶來的不便，因此根據(jù)冰片(2-莰醇)的極性，選擇了弱極性的色譜柱(OV-101)來替代原方法中的中等極性色譜柱(PEG-20M或PEG-2M)，同時(shí)將內(nèi)標(biāo)物選為正十二烷(原方法為正辛烷或正十七烷)，結(jié)果冰片出峰時(shí)間提前，內(nèi)標(biāo)峰與冰片峰不僅能完全分開，而且相距僅1分鐘左右，6分鐘即可完成一次分析測(cè)定。而原方法中冰片峰與內(nèi)標(biāo)峰間隔約7分鐘，分析時(shí)間長(zhǎng)達(dá)20分鐘。經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)證明，改進(jìn)后的方法比原方法快捷，而且分離效果更佳。在本文選定的色譜分析條件下，內(nèi)標(biāo)物與冰片濃度比為1∶0.3～1∶1.5時(shí)峰面積與濃度線性關(guān)系，所繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)性好，相關(guān)系數(shù)為0.9997，平均回收率為99.0%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.4039。因而該方法有較好的精密度和準(zhǔn)確度，而且也節(jié)約了分析時(shí)間。
1 實(shí)驗(yàn)部分
1.1 儀器、試劑及測(cè)試條件 意大利FISONS公司GC8340-00型氣相色譜儀 色譜柱：OV-101石英玻璃毛細(xì)管柱，柱長(zhǎng)25 m，柱徑0.32 mm 檢測(cè)器：FID，靈敏度103 冰片：化學(xué)對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所) 正十二烷：色譜純(上海試劑一廠) 內(nèi)標(biāo)溶液：將52.5 mg正十二烷溶于25 ml醋酸乙酯中搖勻備用 氣流：N2 50 kPa，65 ml/min；H2 35 ml/min；Air300 ml/min 溫度：柱溫 120℃；進(jìn)樣口180℃；檢測(cè)器：220℃
1.2 相對(duì)校正因子的測(cè)定及線性范圍的確定 精確稱取冰片20.18 mg、34.91 mg、47.13 mg、59.00 mg、73.81 mg于25 ml容量瓶中，各精確加入正十二烷約52.50 mg作內(nèi)標(biāo)，用醋酸乙酯稀釋至刻度，溶解后搖勻備用。 各精確吸取上述溶液[WTBZ]1 ul按1.1的條件測(cè)定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸直線方程：y=0.7469x+0.0266 相關(guān)系數(shù)：r=0.9997 注：WI=內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量Ws=樣品質(zhì)量 AI=內(nèi)標(biāo)峰面積As=樣品峰面積 ，當(dāng)內(nèi)標(biāo)物與冰片濃度比為1∶0.3～1∶1.5時(shí)峰面積與濃度成線性關(guān)系。 由上述1.2配制的五個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液(各加入52.50 mg內(nèi)標(biāo))所測(cè)定的氣相色譜圖，分別求出相對(duì)校正因子及其平均值，結(jié)果列于表1。 冰片的相對(duì)校正因子根據(jù)下式計(jì)算： Ms=樣品濃度 As=樣品峰面積 Mi=內(nèi)標(biāo)濃度 Ai=內(nèi)標(biāo)峰面積
表1 冰片的相對(duì)校正因子測(cè)定值 相對(duì)校正因子 RSD(%) f1 f2 f3 f4 f5
1.3212 1.3398 1.2835 1.2940 1.2957 1.3068 1.764
1.3 樣品溶液的制備及測(cè)定 將藥丸研細(xì)，精確稱取約400 mg于10 ml具塞玻管中，再準(zhǔn)確加入內(nèi)標(biāo)溶液3 ml，振搖15秒后在離心機(jī)上分離，分出的上層清液轉(zhuǎn)入一具塞容量瓶中備用。另加5 ml蒸餾水于上述含沉淀的玻管中，于40℃水浴上加熱15分鐘，再精確加入內(nèi)標(biāo)溶液3 ml，振搖15秒后，離心分離，分出的上層清液也轉(zhuǎn)入上述容量瓶中備用。最后再精確加入內(nèi)標(biāo)溶液3 ml于含沉淀玻管中，同法萃取后將分出的上層清液與前兩次的合并得樣品溶液。精確吸取1 ul樣品溶液作氣相色譜分析。氣相色譜圖：冰片的右旋峰、左旋峰、內(nèi)標(biāo)峰的保留時(shí)間分別為4.20 min、4.59 min、5.32 min。
2 結(jié)果與討論
2.1 色譜柱的選擇 根據(jù)冰片(2—莰醇)的極性，如選擇文獻(xiàn)中的中等極性柱(固定液為)PEG-20M或PEG-2M，則冰片與固定液的相互作用較大，因此在柱中滯留的時(shí)間長(zhǎng)，從而使分析時(shí)間較長(zhǎng)。本文改用固定液為OV-101的弱極性柱，可使冰片在進(jìn)樣4分鐘之后即可出峰，比文獻(xiàn)提前了8分鐘，并且冰片的左、右旋峰能完全分離，證明柱分離效果良好。
2.2 內(nèi)標(biāo)的選擇： 通過多次實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)在1.1測(cè)試條件下，正十二烷出峰時(shí)間為5.30 min左右，與冰片峰相隔最近，而正十四烷、正十七烷出峰時(shí)間均為6分鐘以上，因此正十二烷出峰位置最佳，不僅能與冰片峰完全分離，而且與冰片峰最接近，是理想的內(nèi)標(biāo)物。
3 結(jié) 論 從繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線以及回收率和精密度數(shù)據(jù)來看，本方法準(zhǔn)確、穩(wěn)定、重現(xiàn)性好，而且快速、實(shí)用，完全能夠滿足廠家對(duì)中成藥中冰片含量分析的要求。
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